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IPHASE/匯智和源 PBMC在免疫治療藥物研發(fā)中的應(yīng)用熱點問題解答

更新時間:2023-12-28      點擊次數(shù):1983

—熱點問題—


第一題    CD4+T細胞加普通培養(yǎng)基可以培養(yǎng)幾天?


經(jīng)多次驗證,分選后的CD細胞在普通培養(yǎng)基中僅能維持24~48小時,且隨著時間的延長細胞活力和狀態(tài)都在不斷的下降。


第二題    PBMC可以在體外擴增嗎?


PBMC在沒有相關(guān)細胞因子存在情況下不能擴增。由于PBMC是一群混合細胞,即使添加了細胞因子也只能是某些亞型細胞的擴增,最終導致PBMC細胞組成比例發(fā)生改變。


第三題    分選后的細胞想要培養(yǎng),應(yīng)該選擇什么培養(yǎng)基?普通1640是否可以?


不同亞型免疫細胞擴增需要在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加不同的細胞因子或細胞因子組合,基礎(chǔ)培養(yǎng)基可選用1640培養(yǎng)基。為滿足客戶的不同需求,IPHASE正在陸續(xù)推出不同亞型細胞的擴增、分化培養(yǎng)基,敬請期待!


第四題    凍存PBMC,復(fù)蘇后細胞亞群比例會改變么?


凍存PBMC復(fù)蘇后細胞亞群比例是否改變與凍存液的凍存效果有關(guān)。凍存效果好的凍存液細胞凍存復(fù)蘇后活率高,則細胞亞群比例不會發(fā)生顯著改變。IPHASE推出的PBMC凍存液細胞復(fù)蘇后活率>90%,完-全滿-足后續(xù)實驗要求。


第五題    陽選,陰選,適配體分選如何選擇?


若靶抗原與磁珠偶聯(lián)抗體的持續(xù)結(jié)合不影響后續(xù)實驗,比如分選細胞用于RNA或蛋白的提取,則可以考慮陽選試劑盒。反之,則需要選擇陰選或IPHASE的適配體無痕分選試劑盒。IPHASE適配體無痕分選試劑盒分選后純度>95%,且細胞不帶磁珠和與靶抗原結(jié)合的適配體分子,兼具有陽選試劑盒和陰選試劑盒的優(yōu)點。


第六題    凍存PBMC能用于細胞分選試驗嗎?


IPHASE推出的分選試劑盒均可用于凍存PBMC的細胞分選。


第七題    我公司最近想開發(fā)PBMC質(zhì)控品,想尋找一款凍存效果較好的凍存液,有推薦嗎?


IPHASE無血清細胞凍存液適用于您的需求,細胞復(fù)蘇存活率>90%,得率>85%,復(fù)蘇后細胞亞群比例不發(fā)生改變。


第八題    通過陽性分選試劑盒得到的細胞是否可通過流式細胞儀進行檢測?


通過陽性分選的方法得到的細胞與磁珠連接,但所使用磁珠為納米磁珠,理論上不影響流式細胞儀的檢測。如有疑慮,可嘗試使用培養(yǎng)外加反復(fù)吹吸的方式使得細胞和磁珠脫離后再進行流式檢測。需注意的是,流式抗體選擇請嚴格參照產(chǎn)品說明。


第九題    IPHASE的人PBMC進行HLA分型鑒定嗎?IPHASE的人PBMC供體庫有多大?


IPHASE的人PBMC均進行了HLA分型鑒定。IPHASE的人PBMC供體庫目前有近百個donor,庫容量正在逐漸增加,客戶可以從我們?nèi)薖BMC供體庫中選擇適合自己實驗的PBMC。


第十題    凍存PBMC復(fù)蘇操作上應(yīng)注意哪些細節(jié)?


首先,需要37℃預(yù)熱復(fù)蘇培養(yǎng)基。其次,水浴解凍細胞時要注意管內(nèi)細胞融化狀態(tài),當融化至少量冰晶時終止水浴。最后,離心力、離心時間需按隨貨說明書建議進行參數(shù)設(shè)置。


十一題    IPHASE人CD3/CD28+T細胞活化擴增試劑盒刺激細胞擴增最長時間是多少?


IPHASE人CD3/CD28+T細胞活化擴增試劑盒刺激細胞擴增我們只驗證到15天,擴增效率超千倍,此時細胞仍保持良好狀態(tài),完-全可以進一步延長時間進行擴增培養(yǎng)。


十二題    IPHASE提供的凍存人PBMC細胞有哪些規(guī)格?


IPHASE可提供凍存、新鮮兩種狀態(tài)的細胞,且包含5million/支,10 million/支,50 million/支等多種規(guī)格。


發(fā)    文    章    得     獎    勵


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